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產品名稱:
胚肺二倍體細胞;KMB-17
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胚肺二倍體細胞;KMB-17相關產品:
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  胚肺二倍體細胞;KMB-17的詳細資料:

細胞名稱  胚肺二倍體細胞;KMB-17
形態特性: 成纖維細胞樣

生長特性: 貼壁生長

特征特性: 來自于4周齡女孩胚胎,1975年中國醫學科學院昆明醫學生物學研究所建立;可作為轉染宿主,用于肺損傷或分化的研究。

培養條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)新生牛血清,10%;水解乳蛋白,10%

傳代方法: 1:2-1:4

傳代情況: P10

凍存條件: 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS

支原體檢測: 培養法(-)
公司細胞廣泛用于國內院校的細胞生物學研究,作為實驗項目研究。下列產品詳細介紹:

產品名稱

生長特性

貨號

胚肺二倍體細胞;KMB-17

貼壁生長

EY-X63452

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冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法; 
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理; 
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率; 
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的  *細胞培養液,吹打下細胞,即可直接用于后續實驗。
④如果發現消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養器皿底部脫落, 直接用細胞培養液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養液重新懸浮細胞,即可用于后續實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
rrCXCL3/CINC-2b, CF (25 UG)細胞名稱: 貓腎細胞;CRFK MEM-

酚紅Jak2 (D2E12) XP® Rabbit mAb (Biotinylad)甲基三丁基化銨
環貝特CD44 (156-3C11) Mouse mAb (Biotinylad)2-溴酰溴
曙紅Y(水溶)TCL1 Antibody2-溴吡
偶氮胭脂紅BBAP31 Antibody2-二環己基-2,4,6-三異基聯
偶氮胭脂紅GHEF1/NEDD9 (2G9) Mouse mAb2-二-叔丁膦基-2',4',6'-三異基聯
熒光桃紅B,酸性紅92GCN2 (E9H6C) Rabbit mAbBoc-L-beta-高
依萊鉻紅BWWOX Antibody奎尼丁
固紅RLWWOX Antibody基磺酰
固紅紫色LB鹽hnRNP A0 Antibody2-溴代異戊酸
莧菜紅ACSL1 Antibody(S)-(-)-2-甘氨
麗春紅4R,新胭脂紅,亮麗春紅5R,酸性紅18M-Cadherin (D4B9L) Rabbit mAb5-氨基-2-溴嘧啶
酚藏花紅M-Cadherin (D4B9L) Rabbit mAb2-芐基酸
天狼星玫紅,BBTHEX1 Antibody對甲氧基基酚
釕紅Tris-Glycine SDS Running Buffer (10X) 5-氨基-2-氟甲酸
藻紅B,四熒光素Phospho-Akt (Ser473) (587F11) Mouse mAb沒有中文名
酸性紅88 Phospho-Akt (Ser473) (587F11) Mouse mAb氟-2-
酸性紅183THEX1 (D2B4) Rabbit mAb(S)-羥基丁酸酯
酸性紅9PKM2 (D78A4) XP® Rabbit mAbL-谷氨酰
孔雀石綠PKM2 (D78A4) XP® Rabbit mAbL-賴氨酸
燦爛綠,亮綠Phospho-Drosophila Akt (Ser505) Antibody6-甲氧基-2,3,4,5-四氫吡啶
甲基綠THEX1 (D66A11) Rabbit mAb2,二-5-甲基吡啶
茜素綠;酸性綠25Phospho-Akt (Thr308) (244F9) Rabbit mAb(R)-縮水甘油
萘酚綠BPhospho-Akt (Thr308) (244F9) Rabbit mAb氧甲酰基亞基三基膦
固綠FCFPhospho-Akt (Ser473) (193H12) Rabbit mAb甲酸
子種綠A;藍APhospho-Akt (Ser473) (193H12) Rabbit mAb2-甲氧基基酸
亮綠SF(淡黃)Phospho-Akt (Ser473) (193H12) Rabbit mAb甲氧基酸
健那綠BAkt3 Antibody2,3,4,6-四酰氧基-alpha-D-吡喃葡萄糖溴化物
酸性綠3CNOT3 (D4K4N) Rabbit mAb1-叔丁氧羰基哌
酸性綠 50 Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb-2-吡啶甲酸
酸性綠APhospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb2-溴蒽醌
Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAbN-BOC-GAMMA-氨基丁酸
靛藍N-Cadherin Antibody9-溴菲
甲基藍CD6 (E9Y7Y) Rabbit mAb戊鈉
伊文思藍;埃文斯藍MST3b Antibody2-氨基--6-甲氧基嘧啶
曲利藍LSD1 (1B2E5) Mouse mAb5--2-氟
維多利亞藍B,性藍 26CXXC1 (D1R5R) Rabbit mAb2-溴-5-氟

胚肺二倍體細胞;KMB-175核苷酶(5-NT)ELISA試劑盒LHELISAKit產品規格:48T/96T。

人腺嘌呤二核苷磷(NADPH)ELISA試劑盒LHELISAKit產品規格:48T/96T。

L丙氨解氨酶(PAL)ELISA試劑盒LHRHELISAKit產品規格:48T/96T。

N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA試劑盒LHRHELISAKit產品規格:48T/96T。

α2抗纖溶酶(α2-AP)ELISA試劑盒LHRHELISAKit產品規格:48T/96T。

α2纖溶酶抑制物(α2-PI)ELISA試劑盒LIFELISAkit產品規格:48T/96T。

αL艾杜糖苷酶(IDUA)ELISA試劑盒LIFELISAKit產品規格:48T/96T。

αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)ELISA試劑盒LIFELISAkit產品規格:48T/96T。

產品相關關鍵字: 胚肺二倍體細胞 KMB-17
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